Determination of K, Na, and Zn in Albumin Using Flame AAS

Význam tématu

Albumin představuje hlavní transportní protein v krevní plazmě a podílí se na regulaci osmotického tlaku a distribuci kovových iontů. Určení koncentrací sodíku, draslíku a zinku v albuminu je klíčové pro biologické, klinické a farmaceutické aplikace, včetně monitorování nutričního stavu a sledování onemocnění.

Cíle a přehled studie

Cílem studie bylo vyvinout a ověřit jednoduchou a spolehlivou metodu pro kvantitativní stanovení Na, K a Zn v 25% roztocích albuminu pomocí plamenné atomové absorpční spektrometrie (Flame AAS) na přístroji Agilent 240 FS. Studie zahrnovala přípravu vzorků, kalibraci, ověření přesnosti a reprodukovatelnosti metody.

Použitá metodika a instrumentace

Pro analýzu byla použita plamenná AAS s Agilent 240 FS, vybavená:

• plně reflektivní optikou a dvoupaprskovým designem pro vysokou přenosovou účinnost a nízký šum
• Czerny-Turnerovým monochromátorem s holografickým mřížkovým elementem a mikrokrokovým pohonem
• automatizovanou regulací plamene s rychlým přepínáním mezi vzducho-acetylénovým a N₂O-acetylénovým režimem
• duálním a čtyřnásobným napájením lamp pro sekvenční multi-elementová měření
• rychlým deuterovým korektorem pozadí pro vlnové délky 185–425 nm
• externí komorou se PTFE dopadem a korozivzdornou kapilárou z PEEK
• hořákem optimalizovaným pro vysoký obsah pevných látek a minimální ucpávání

Pro přípravu vzorků byla použita kyselina octová v kvalitě trace metal a deionizovaná voda o vodivosti 18,2 MΩ·cm. Kalibrace probíhala se standardy Na, K a Zn v rozsahu 0,5–1,0 mg/L; kvalita metody byla ověřena kontrolními standardy a spike recovery testy.

Hlavní výsledky a diskuse

• Měřené koncentrace Na, K a Zn spadaly do očekávaného rozmezí s variabilitou RSD <1 %.
• Spike recovery dosáhly 100–107 %, potvrzující odolnost metody vůči maticovým efektům.
• QC vzorky před a po běhu se udržely v ±10 % od skutečné hodnoty, charakteristické koncentrace byly 0,0048–0,0300 mg/L, korelační koeficienty >0,998.
• Meze detekce vypočtené z trojnásobku směrodatné odchylky sedmi replik činí 0,008 mg/L pro Na, 0,009 mg/L pro K a 0,001 mg/L pro Zn.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlá a automatizovaná analýza s minimální potřebou vzorku.
• Vysoká přesnost a reprodukovatelnost vhodné pro klinické, výzkumné i QA/QC aplikace.
• Sekvenční měření více prvků bez nutnosti výměny lamp nebo plamenového nastavení.

Budoucí trendy a možnosti využití

• Další zvyšování citlivosti díky pokročilým detektorům a redukci šumových složek.
• Integrace s automatizovanými přípravnými systémy pro vysokou propustnost v klinických laboratořích.
• Rozšíření na stanovení dalších stopových kovů a biomarkerů v komplexních biologických matricích.

Závěr

Navržená metoda Flame AAS na Agilent 240 FS pro stanovení Na, K a Zn v albuminových vzorcích prokázala vynikající přesnost, opakovatelnost a odolnost vůči maticovým vlivům. Jednoduchá příprava a plná automatizace ji činí ideální volbou pro rutinní analýzy.

Reference

• Lajunen L. H. J., Peramäki P. Spectrochemical Analysis by Atomic Absorption and Emission. Royal Society of Chemistry, Cambridge, 2004.
• US Department of Health and Human Services, National Institutes of Health. www.nih.gov; přístup 10. července 2006.