Stunner Biologics Characterization

Význam tématu

Charakterizace proteinů je zásadní pro vývoj biotechnologických a farmaceutických produktů, zajištění jejich kvality, stability a funkčnosti. Efektivní a spolehlivá analýza koncentrace, velikosti a agregace proteinů urychluje výzkum a výrobní procesy.

Cíle a přehled studie / článku

Představuje se systém Stunner, který kombinuje UV/Vis spektroskopii a dynamické rozptylové měření (DLS) na pouhém 2 µL vzorku. Metoda umožňuje simultánní stanovení koncentrace, velikostního rozložení, detekci agregátů, interakčních parametrů (B22, kD) a charakterizaci konjugovaných proteinů.

Použitá metodika a instrumentace

• UV/Vis spektroskopie s dvojitými pevnými optickými drahami (0,1 a 0,7 mm) pro rozsah 0,03–275 OD.
• Dynamický rozptyl světla (DLS) a vícekoutový RADLS (5–30 úhlů) pro měření hydrodynamických průměrů 0,3–1000 nm.
• Microfluidická 96-well destička, vzorek 2 µL, rychlost: 10 min pro UV/Vis, 1 h pro UV/Vis + DLS.
• Spectrofotometr: xenonová výbojka, DLS laserové diody 660 nm, detektory APD.

Hlavní výsledky a diskuse

• Přesnost koncentrace: CV <1 %, přesnost <2 %, lineární rozsah do 275 mg/mL.
• Velikostní analýza: Z-průměr 6,6 nm (ovalbumin), 22 nm (thyroglobulin), PDI ~0,1, vysoká reprodukovatelnost.
• Detekce agregátů: citlivost na 1 % navázaných agregátů, rozdělení podle hmotnosti a intenzity.
• Interakční parametry: stanovení B22 a difúzního koeficientu kD pro posouzení atraktivních či repulsivních interakcí.
• Konjugáty: analýza poměru protilátka–látka (DAR) a protilátka–oligonukleotid pomocí analýzy Unmix.

Přínosy a praktické využití metody

• Minimální objem vzorku (2 µL) a vysoká propustnost (96 vzorků za hodinu).
• Integrovaná měření šetří čas a materiál.
• Široký rozsah měřitelných koncentrací a velikostí.
• Automatizace a kompatibilita s pipetovacími roboty.
• Vhodné pro QC, výzkum, vývoj biofarmak.

Budoucí trendy a možnosti využití

Systém lze rozšířit o další analytické moduly, automatizaci plnění a datovou integraci. Předpokládá se využití v kontinuálním monitoringu bioprocesů, v multi-parametrickém screeningu proteinových knihoven a dalších typů biomolekul.

Závěr

Unifikovaný přístup Stunneru významně zrychluje a zpřesňuje charakterizaci proteinů a jejich konjugátů. Kombinace UV/Vis a DLS přináší komplexní přehled o koncentraci, velikosti, stabilitě a interakcích, což podporuje efektivní rozhodování v biotechnologii a farmaceutickém průmyslu.

Reference

Žádné odkazy na literaturu uvedeny.