The Cary Eclipse—provides sensitivity and accuracy where you need it

Význam tématu

Fluorescenční rozbory jsou klíčové v biochemii, medicíně i průmyslové analýze díky své vysoké citlivosti a selektivitě. Optimalizace zdroje světla a detekčního systému je nezbytná pro přesná měření širokého spektra fluoroforů, zejména v oblastech, kde může dojít k fotodegradaci vzorku.

Cíle a přehled studie / článku

Prezentovat spektrální a provozní vlastnosti spektrofotometru Agilent Cary Eclipse s xenonovou bleskovou lampou. Zaměřit se na:

• citlivost v UV a viditelné oblasti,
• odolnost proti fotodegradaci,
• praktické výhody dlouhé životnosti lampy.

Použitá metodika a instrumentace

Spektrofotometr Cary Eclipse je vybaven xenonovou bleskovou lampou s nulovou dobou zahřívání a zárukou desetileté životnosti. Systém pokrývá excitační rozsah od 200 do 900 nm. Optická konstrukce minimalizuje nežádoucí světelné artefakty a fotoúbytek vzorků. Další klíčové komponenty:

• Monochromátor pro precizní volbu vlnové délky,
• Citlivý detektor s nízkým šumem,
• Termostabilizované měřící komory a příslušenství pro kinetická měření.

Hlavní výsledky a diskuse

Experimentálně bylo doloženo vysoké parametry citlivosti jak v UV (Ex350/Em400 nm), tak ve viditelné oblasti (Ex500/Em602 nm), kde běžně pracují fluorofory jako fluorescein či rhodamin. Grafické znázornění spektrální distribuce ukazuje, že většina analyzovaných fluoroforů spadá do oblasti, kde Cary Eclipse nabízí optimální poměr signál/šum. Xenonová lampa významně snižuje fotodegradaci ve srovnání s kontinuálními výbojkami, což vede k vyšší reprodukovatelnosti dat.

Přínosy a praktické využití metody

Spektrometr nabízí:

• Více režimů analýzy: fluorescenční, fosforescenční, chemiluminiscence i časově-rozlišená měření,
• Okamžitou připravenost k provozu bez zahřívací fáze,
• Snížení provozních nákladů a rizika při výměně lampy,
• Zjednodušenou manipulaci se vzorky díky otevřené komoře.

Budoucí trendy a možnosti využití

Další rozvoj směřuje k integraci s automatizovanými systémy vysokopropustné analýzy, pokročilým kinetickým studiím interakcí biomolekul a k použití nových nanomateriálů emisí v infračervené oblasti. V biomedicíně se očekává širší uplatnění v diagnostických soupravách a sledování biologických procesů in vivo.

Závěr

Agilent Cary Eclipse představuje robustní a všestranný nástroj pro fluorescenční analýzy s vynikající citlivostí a spolehlivostí. Xenonová blesková lampa eliminuje omezení spjatá s fotodegradací a přináší významné úspory časové i finanční.

Reference

• Agilent Application Note 5990-7791EN: Eliminace fotodegradace pomocí xenonové lampy.
• Agilent Technologies, Inc. Cary Eclipse Fluorescence Spectrophotometer, publikováno v USA, březen 2016, 5991-6740EN.