Agilent Cary Eclipse Fluorescence Spectrophotometer

Význam tématu

Fluorescenční spektrofotometrie je klíčovou metodou v analytické chemii a biologii pro citlivou detekci a kvantifikaci látek v různých vzorcích.
Díky vysoké citlivosti, rychlému sběru dat a možnosti měřit živé buňky i pevné látky představuje univerzální nástroj pro výzkum i rutinní analýzy.

Cíle a přehled studie / článku

Tento dokument představuje hlavní vlastnosti a aplikační scénáře spektrofotometru Agilent Cary Eclipse s xenonovou flash lampou.
Autoři demonstrují využití v biovědních experimentů, zahrnujících stanovení kvantového výtěžku nanokrystalů, kinetiku receptorové oligomerizace a analýzu stability biomolekul.

Použitá metodika a instrumentace

• Spektrofotometr Agilent Cary Eclipse vybavený xenonovou výbojkou pro fluorescenční, fosforescenční a bioluminiscenční měření.
• Software Cary WinFLR s aplikací Ratio pro poměrové měření intracelulárních iontů (např. Ca²⁺).
• Příslušenství: rychlý filtr pro kinetická měření (50 ms rozlišení), peltierova buňka pro kontrolovanou teplotu, držák práškových vzorků, optická vlákna pro kapalné a pevné vzorky, automatické polarizátory a mikrodestičková čtečka.

Hlavní výsledky a diskuse

• Celistvé spektrální skeny do 3 s a sběr až 80 bodů/s pro sledování rychlých kinetik.
• Room light immunity: spolehlivá měření s otevřenou i uzavřenou komorou bez nutnosti úplného zatemnění.
• Stanovení kvantového výtěžku nanokrystalů (quantum dots) v křemenné kyvetě.
• Charakterizace GPCR oligomerizace a intracelulární mobilizace Ca²⁺ pomocí poměrové metody 340/380 nm.
• Analýza termální stability lyofilizovaných proteinů a určení teploty tání (Tm) fluorescenčně značené PNA/DNA sondy.

Přínosy a praktické využití metody

• Dlouhá životnost lampy (>10 let) s nízkými provozními náklady.
• Široká modulární nabídka příslušenství umožňuje analýzu kapalin, pevných vzorků i mikrotitračních destiček.
• Vysoká rychlost sběru dat umožňuje sledovat dynamiku biologických a chemických procesů v reálném čase.
• Vysoká reprodukovatelnost a přesnost měření kvantových výtěžků i kinetik.

Budoucí trendy a možnosti využití

Integrace mikrodestičkových platforem pro vysokopropustné screeningy
Použití strojového učení pro pokročilou analýzu komplexních dat
Rozvoj multiplexních fluorescenčních assay a in vivo zobrazovacích přístupů
Miniaturizace přístrojů a přenosné systémy pro terénní měření

Závěr

Spektrofotometr Agilent Cary Eclipse se vyznačuje modulární konstrukcí, rychlým sběrem dat a robustním softwarem, což jej činí všestranným nástrojem pro výzkum i rutinní analýzy v oblasti analytické chemie.
Díky kombinaci citlivosti, flexibility a dlouhé životnosti lampy nabízí spolehlivou a ekonomickou platformu pro široké spektrum fluorescenčních a luminescenčních aplikací.