Micro Volume Photometric Measurement of Nucleic Acid using TrayCell with UV-1280
Aplikace | 2015 | ShimadzuInstrumentace
Nukleové kyseliny se často připravují v objemech menších než 5 µl, což vyžaduje citlivé a reprodukovatelné metody kvantifikace. Konvenční 10 mm kyvety potřebují minimálně 50 µl vzorku a náročnější čištění. Hellma TrayCell umožňuje analýzu mikroobjemů 0,7–10 µl a zkracuje dobu přípravy i riziko kontaminace.
Cílem aplikace je demonstrovat využití spektrofotometru Shimadzu UV-1280 v bio režimu spolu s Hellma TrayCell pro rychlou a spolehlivou mikroobjemovou měření koncentrace nukleových kyselin.
Pro 100 bp DNA žebřík z Promega (3 µl vzorku) bylo provedeno deset replikátů měření. Průměrná absorbance při 260 nm činila 0,275, standardní odchylka 0,004 a relativní standardní odchylka (RSD) 1,32 %, což dokládá vysokou opakovatelnost. Poměry A260/A280 1,8–1,9 a A260/A230 >2,0 potvrzují dobrou čistotu vzorku bez významné proteinové či fenolové kontaminace.
Očekávaný rozvoj zahrnuje integraci s automatizovanými pipetovacími systémy, rozšíření metodik na další biomolekulární assay (např. sekundární struktury RNA), a adaptaci na vysokokapacitní laboratorní linky pro screeningové aplikace.
Shimadzu UV-1280 v kombinaci s Hellma TrayCell poskytuje rychlou, přesnou a úspornou metodu pro mikroobjemovou analýzu nukleových kyselin s vynikající reprodukovatelností a minimálním odpadem.
UV–VIS Spektrofotometrie
ZaměřeníFarmaceutická analýza
VýrobceShimadzu
Souhrn
Význam tématu
Nukleové kyseliny se často připravují v objemech menších než 5 µl, což vyžaduje citlivé a reprodukovatelné metody kvantifikace. Konvenční 10 mm kyvety potřebují minimálně 50 µl vzorku a náročnější čištění. Hellma TrayCell umožňuje analýzu mikroobjemů 0,7–10 µl a zkracuje dobu přípravy i riziko kontaminace.
Cíle a přehled studie / článku
Cílem aplikace je demonstrovat využití spektrofotometru Shimadzu UV-1280 v bio režimu spolu s Hellma TrayCell pro rychlou a spolehlivou mikroobjemovou měření koncentrace nukleových kyselin.
Použitá metodika a instrumentace
- Spektrofotometr Shimadzu UV-1280 s přednastavenými bio metodami pro kvantifikaci DNA a proteinů.
- Hellma TrayCell: fiber-optická ultra-mikro kyveta se standardním rozměrem 10 mm, avšak s optickou délkou cesty 1 mm nebo 0,2 mm (objemy 0,7–10 µl).
- Měření průměru absorbancí při 260 nm, poměr A260/A280 a A260/A230 pro odhad čistoty DNA.
Hlavní výsledky a diskuse
Pro 100 bp DNA žebřík z Promega (3 µl vzorku) bylo provedeno deset replikátů měření. Průměrná absorbance při 260 nm činila 0,275, standardní odchylka 0,004 a relativní standardní odchylka (RSD) 1,32 %, což dokládá vysokou opakovatelnost. Poměry A260/A280 1,8–1,9 a A260/A230 >2,0 potvrzují dobrou čistotu vzorku bez významné proteinové či fenolové kontaminace.
Přínosy a praktické využití metody
- Minimalizace spotřeby vzorku a reagentů.
- Rychlá příprava a snadné čištění oproti klasickým kyvetám.
- Vysoká reprodukovatelnost měření a integrované bio metody pro automatizovanou kvantifikaci.
Budoucí trendy a možnosti využití
Očekávaný rozvoj zahrnuje integraci s automatizovanými pipetovacími systémy, rozšíření metodik na další biomolekulární assay (např. sekundární struktury RNA), a adaptaci na vysokokapacitní laboratorní linky pro screeningové aplikace.
Závěr
Shimadzu UV-1280 v kombinaci s Hellma TrayCell poskytuje rychlou, přesnou a úspornou metodu pro mikroobjemovou analýzu nukleových kyselin s vynikající reprodukovatelností a minimálním odpadem.
Reference
- Shimadzu (Asia Pacific) Pte. Ltd. AD-0088: Micro Volume Photometric Measurement of Nucleic Acid using TrayCell with UV-1280
Obsah byl automaticky vytvořen z originálního PDF dokumentu pomocí AI a může obsahovat nepřesnosti.
Podobná PDF
Accuracy in Microvolume Measurements. Investigating the Precision and Reproducibility of Cary 50, 300 and 4000 series Instruments for Microlitre samples
|Agilent Technologies|Aplikace
NOTICE: This document contains references to Varian. Please note that Varian, Inc. is now part of Agilent Technologies. For more information, go to www.agilent.com/chem. Sample Analysis Report Number 49 Accuracy in Microvolume Measurements. Investigating the Precision and Reproducibility of Cary…
Klíčová slova
dna, dnatraycell, traycellhellma, hellmapathlength, pathlengthlimits, limitsnucleic, nucleicspectrophotometer, spectrophotometeralignment, alignmentmicrovolume, microvolumemonochromator, monochromatorscan, scannormal, normalevaporative, evaporativedetection, detectionmonochromation
Quantitation of Nucleic Acids – Trace Measurement Using TrayCell and Nano Stick –
2018|Shimadzu|Aplikace
LAAN-A-UV-E072 Application News No. A577 Spectrophotometric Analysis Quantitation of Nucleic Acids – Trace Measurement Using TrayCell and Nano Stick – Ultraviolet-visible (UV-VIS) spectrophotometers are used in quantitative and qualitative analysis of substances in many fields. Purity confirmation and quantitation of…
Klíčová slova
nucleic, nucleicabsorbance, absorbancetraycell, traycellquantitation, quantitationstick, stickvalue, valuenano, nanomeasurement, measurementindicate, indicatedripped, drippedcorrelation, correlationacid, acidwavelength, wavelengthdeviation, deviationnews
Shimadzu UV Talk letter Vol. 21
2023|Shimadzu|Ostatní
C101-E176A Vol. 21 Effect of Measurement Parameters on UV-VIS Absorption Spectra ------- 02 Applications Examples of Analysis Using Micro-Volume Measurement Cells ------- 06 Q&A What is the difference between absorbance and optical density (O.D.)? ------- 13 PQY-01 Photoreaction Evaluation System…
Klíčová slova
traycell, traycellstick, sticklight, lightnano, nanomeasurement, measurementwavelength, wavelengthintervals, intervalsslit, slitwidth, widthcells, cellsoptical, opticallightway, lightwaypath, pathabsorption, absorptionlength
Micro Volume Quantitation Measurement of Nucleic Acid using Nano Stick with UV-1280
2015|Shimadzu|Aplikace
Application News UV-1280, Nano Stick, Nucleic Acid Micro Volume Quantitation Measurement of Nucleic Acid using Nano Stick with UV-1280 AD-0097 Introduction An ultraviolet-visible (UV-VIS) spectrophotometer can be used for quantitation of nucleic acids and proteins and such samples are…
Klíčová slova
sinco, sincostick, sticknucleic, nucleicspectrophotometer, spectrophotometermicro, micronano, nanodna, dnavolume, volumeabsorbance, absorbancenews, newspitch, pitchacids, acidsserially, seriallycuvette, cuvetteoverlapped
