Analysis of Elemental Impurities in Synthetic Oligonucleotides by ICP-MS In compliance with USP <232>/<233> and ICH Q3D(R2)/Q2(R1)

Význam tématu

Analýza prvkových nečistot v syntetických oligonukleotidech je klíčová pro zajištění kvality a bezpečnosti biotechnologických a terapeutických produktů. Přítomnost kovových kontaminantů může ovlivnit biologickou aktivitu a stabilitu oligonukleotidů, proto je nutné monitorovat povolené denní dávky dle směrnic USP a ICH.

Cíle a přehled studie / článku

Studie prezentuje workflow pro kvantifikaci 24 kovových prvků v oligonukleotidové matrici pomocí Agilent 7850 ICP-MS v souladu s USP 232/233 a ICH Q3D(R2)/Q2(R1). Cílem bylo ověřit přesnost, opakovatelnost, specifičnost, detekovatelnost a robustnost metody.

Použitá metodika a instrumentace

Vzorek oligonukleotidu (10 mg/mL) byl 500× naředěn v 3 % HNO3 a 1 % HCl. Analýza proběhla na ICP-MS Agilent 7850 s nastavením ICH/USP předvolby v MassHunter softwaru. Hlavní provozní parametry zahrnovaly RF výkon 1550 W, teplotu komory 2 °C, hloubku odběru 10 mm, proud helia 4,5 mL/min a kinetickou energii filtru 5 V. Automatický autosampler a Elemental Impurities Kit zajistily přesnou kalibraci.

Hlavní výsledky a diskuse

Detekovatelnost pro všechny analyty dosahovala úrovně ppt. Recoverie 1J spikovaných vzorků byly v rozmezí 85–115 %. Opakovatelnost (n=6) a mezilaboratorní robustnost (n=12) vykázaly RSD pod 2,5 % respektive 4 %. Drift i QC stabilita během sedmihodinového běhu zůstaly v rámci ±20 % a RSD QC měření pod 2,6 %. Linearita byla vynikající s regresními koeficienty > 0,999.

Přínosy a praktické využití metody

• Rychlá a citlivá detekce kovových nečistot na úrovni ppt.
• Plná shoda s regulatorními požadavky USP a ICH.
• Vhodnost pro rutinní kontrolu kvality syntetických biopolymerů.

Budoucí trendy a možnosti využití

S rozvojem terapeutických oligonukleotidů se očekává širší implementace ICP-MS metod pro nové modality, včetně RNA-terapií a exosomálních nosičů. Integrace automatizace vzorkové přípravy a rozšíření o další prvky vytvoří komplexnější profil bezpečnosti.

Závěr

Použitá metoda na Agilent 7850 ICP-MS prokázala vysokou přesnost, spolehlivost a robustnost při analýze 24 prvků v syntetických oligonukleotidech. Splňuje kritéria USP 232/233 a ICH Q3D(R2)/Q2(R1) a představuje efektivní nástroj pro QA/QC biotechnologických produktů.

Reference

• US FDA Guideline for Elemental Impurities Q3D(R2), 2022
• Pharm. Forum <232> Elemental Impurities—Limits, 2016
• US FDA Q2(R1) Validation of Analytical Procedures, 2021
• Pharm. Forum <233> Elemental Impurities—Procedures, 2014